EMP-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407036

概要

EMP3は上皮膜タンパク質3（EMP-3）をコードしており、細胞接着、膜構造の組織化、ならびに細胞表面におけるシグナル伝達の制御に関与するとされるテトラスパン様膜タンパク質です。ヒト細胞では、EMP-3は細胞の状況（コンテキスト）に応じて、受容体関連シグナル伝達や、その下流に位置するMAPK/PI3Kネットワーク構成要素を含む、増殖およびストレス応答に関わる経路の調節と関連づけられています。EMP3の発現パターンの変化は複数の腫瘍タイプで報告されているほか、神経疾患に関連した研究でも報告されており、がん性シグナル、浸潤、分化のモデルにおける分子変数として有用であることが示唆されています。膜関連因子としてのEMP-3は、細胞間相互作用や微小環境への応答の変化を解析する上でも重要です。

EMP-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるEMP3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、EMP3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、EMP3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、EMP-3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、EMP-3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、EMP3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• EMP-3の機能に不可欠なEMP3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、EMP3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• EMP-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびEMP-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、EMP3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  EMP-3 HDRプラスミド（h）および EMP-3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはEMP3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のEMP3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。