EMILIN-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406521

概要

EMILIN2は、弾性線維に関連するミクロフィブリルに豊富に存在する細胞外マトリックス糖タンパク質であるEMILIN-2をコードし、マトリックスの組織化や細胞―マトリックス間シグナル伝達に寄与します。EMILIN-2はインテグリンを介した接着やメカノトランスダクションに関与し、細胞骨格の動態、細胞移動、組織リモデリングに影響を与えます。こうした細胞外からのシグナルを通じて、EMILIN2は炎症や血管・間質の恒常性に関連する経路を調節し、血管新生や線維化反応を形作る過程にも関与し得ます。EMILIN2発現の異常やマトリックス構造の変化は、腫瘍微小環境のリモデリングや心血管系に関連する細胞外マトリックスの異常と関連づけられており、疾患機序の研究における重要性が示唆されています。

EMILIN-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるEMILIN2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、EMILIN2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、EMILIN2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、EMILIN-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、EMILIN-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、EMILIN2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• EMILIN-2の機能に不可欠なEMILIN2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、EMILIN2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• EMILIN-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびEMILIN-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、EMILIN2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  EMILIN-2 HDRプラスミド（h）および EMILIN-2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはEMILIN2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のEMILIN2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。