ELOVL3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407282

概要

ELOVL3（超長鎖脂肪酸伸長タンパク質3）は小胞体に局在するエロンゲースで、飽和および一価不飽和の脂肪酸アシルCoAを伸長し、複合脂質の生合成に用いられる超長鎖脂肪酸を産生します。脂肪酸伸長における役割を通じて、ELOVL3は脂質恒常性、膜組成、ならびに細胞代謝に影響する脂質由来のシグナルおよび貯蔵プールの形成に寄与します。ELOVL3活性は脂質回転の高い組織における脂質代謝プログラムと関連しており、伸長経路の破綻は代謝不均衡や脂質関連の細胞ストレスの文脈でしばしば研究対象となります。超長鎖脂肪酸組成の変化はオルガネラ機能や炎症性シグナル伝達に影響し得るため、ELOVL3は脂質代謝関連の表現型を機序的に解析するうえで重要な結節点となります。

ELOVL3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるELOVL3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ELOVL3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ELOVL3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ELOVL3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ELOVL3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ELOVL3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ELOVL3の機能に不可欠なELOVL3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ELOVL3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ELOVL3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびELOVL3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ELOVL3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ELOVL3 HDRプラスミド（h）および ELOVL3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはELOVL3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のELOVL3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。