ELOVL2 Plasmide Double Nickase (h): sc-404998-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ELOVL2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ELOVL2 Double Nickase Plasmid (h) e il ELOVL2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ELOVL2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ELOVL2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404998-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ELOVL2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404998-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ELOVL2 (elongation of very long chain fatty acids protein 2) è un’elongasi di acidi grassi localizzata nel reticolo endoplasmatico che catalizza le fasi di elongazione limitanti la velocità, producendo acidi grassi polinsaturi a lunga catena, inclusi i precursori della biosintesi del DHA. Modellando la composizione dei fosfolipidi di membrana e i mediatori di segnalazione derivati dai lipidi, ELOVL2 influenza processi cellulari quali la fluidità di membrana, le risposte allo stress ossidativo e l’omeostasi metabolica. Alterazioni dell’attività e della regolazione di ELOVL2 sono state associate a cambiamenti legati all’età nel metabolismo lipidico e nello stato epigenetico, e sono state studiate in contesti che includono la biologia retinica, la neurobiologia e i meccanismi delle malattie metaboliche. In quanto nodo conservato nelle vie di elongazione lipidica, ELOVL2 rappresenta un bersaglio maneggevole per analizzare come la disponibilità di PUFA influenzi la funzione degli organelli e le reti di segnalazione cellulare.
ELOVL2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ELOVL2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ELOVL2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ELOVL2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ELOVL2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.