Elk-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400385-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Elk-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Elk-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Elk-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ELK1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Elk-1 Anticorpo (E-5): sc-365876
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Elk-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400385-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Elk-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400385-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ELK1 codifica o fator de transcrição Elk-1, contendo domínio ETS, um efetor nuclear da sinalização MAPK/ERK que conecta sinais extracelulares de fatores de crescimento e de estresse a respostas transcricionais rápidas. Após fosforilação por ERK, JNK ou p38, o Elk-1 coopera com o fator de resposta ao soro (SRF) em elementos de resposta ao soro para regular genes de resposta imediata que controlam proliferação, diferenciação, plasticidade neuronal e apoptose. A atividade desregulada de ELK1 tem sido associada a programas de sinalização oncogênicos e a processos inflamatórios e neurodegenerativos aberrantes, tornando-o um nó útil para estudar transcrição dependente de estímulo e remodelamento de cromatina. Em células humanas, o Elk-1 também integra a comunicação cruzada entre vias de quinases ao controle transcricional próximo ao promotor, apoiando estudos mecanísticos de transdução de sinal e de redes regulatórias gênicas.
Elk-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ELK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ELK1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ELK1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ELK1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.