eIF4B Lentiviral Activation Particles (h): sc-402494-LAC

EIF4Bは、ヒトの翻訳開始因子eIF4Bをコードしている。eIF4Bはキャップ依存的mRNA翻訳の制御因子であり、43Sプレイニシエーション複合体のリクルートを促進するとともに、eIF4F軸におけるRNAヘリカーゼ活性を高めることで、構造化した5′UTRを通過するスキャニングを可能にする。翻訳効率の調節を介して、eIF4BはPI3K–AKT–mTORやMAPKを含む増殖・ストレス経路からのシグナルを統合し、細胞増殖や適応の過程におけるプロテオーム出力を形作る。eIF4B活性の破綻は、がん化シグナルや生存表現型に関与する翻訳制御プログラムの変化と関連づけられており、上流のキナーゼネットワークと選択的mRNA翻訳を結ぶ結節点としてしばしば研究される。これらの特性により、EIF4Bはヒト細胞における翻訳制御、シグナルから翻訳へのカップリング、ならびに経路依存的なプロテオスタシスを解析するための有用な標的となる。

eIF4B レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なEIF4Bの発現上昇を可能にします。

eIF4B レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、EIF4B転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性eIF4Bの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のEIF4Bゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。