Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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EGFR Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420131-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EGFRO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EGFR (m) e o Plasmídeo Double Nickase EGFR (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Egfr. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EGFR Anticorpo (A-10): sc-373746
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EGFR Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420131-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EGFR Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-420131-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O EGFR (Egfr) de camundongo é uma tirosina quinase receptora que se liga a ligantes da família do fator de crescimento epidérmico (EGF) para desencadear a dimerização do receptor, a autofosforilação e a sinalização a jusante. Uma vez ativado, o EGFR aciona as vias MAPK/ERK, PI3K–AKT, JAK/STAT e PLCγ para regular proliferação, sobrevivência, diferenciação e a homeostase do tecido epitelial. Em modelos murinos, a sinalização dependente de Egfr molda programas de desenvolvimento e respostas a feridas, e a atividade alterada de EGFR é frequentemente usada para estudar a desregulação da sinalização por fatores de crescimento em oncologia e biologia inflamatória. O EGFR também se relaciona com o tráfego endocítico e com reguladores de retroalimentação que ajustam a amplitude e a duração do sinal, apoiando investigações sobre o turnover do receptor e a dinâmica da transdução de sinais.
EGFR O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Egfr em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Egfr. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Egfr. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Egfr interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.