EED 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-401234-NIC

EED는 트라이메틸화된 히스톤 H3 라이신 27(H3K27me3)에 결합하고 EZH2/EZH1 메틸전이효소 활성을 알로스테릭하게 촉진하여 억제성 크로마틴 도메인이 확장·유지되도록 하는 폴리콤 억제 복합체 2(PRC2)의 핵심 구성요소를 암호화합니다. PRC2 의존적 유전자 침묵화를 통해 EED는 세포 정체성 유지, 발달 과정의 전사 프로그램 조절, 증식 및 분화 조절에 기여합니다. EED에 이상이 생기면 후성유전적 억제가 붕괴되어 계통(라인리지) 결정과 크로마틴 조직을 관장하는 경로가 변화할 수 있습니다. PRC2/EED 기능의 이상 조절은 다양한 암과 발달 장애에서 관여하는 것으로 알려져 있어, EED는 후성유전적 조절과 전사 억제를 연구할 때 흔히 표적이 됩니다.

EED 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 EED 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 EED 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 EED의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, EED 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.