EBF3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402181-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EBF3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EBF3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase EBF3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EBF3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EBF3 Anticorpo (N7Q): sc-81999
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EBF3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402181-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EBF3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402181-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EBF3 codifica um fator de transcrição da família “early B-cell factor” que se liga ao DNA por meio de um motivo hélice–alça–hélice conservado, regulando programas gênicos que controlam a diferenciação neuronal, a progressão do ciclo celular e a especificação de linhagens. Em células humanas, o EBF3 integra-se a redes transcricionais que moldam a acessibilidade da cromatina e coordenam o timing do desenvolvimento em contextos neurais e mesenquimais. Alterações em EBF3 têm sido associadas a distúrbios do neurodesenvolvimento, incluindo apresentações sindrômicas com deficiência intelectual e ataxia, em consonância com seu papel na maturação neuronal e na formação de circuitos. Como o EBF3 influencia amplas cascatas transcricionais, ele é frequentemente estudado em modelos de regulação gênica do desenvolvimento, identidade celular e transcrição responsiva ao estresse.
EBF3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EBF3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EBF3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EBF3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EBF3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.