Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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E2F1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420085-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- E2F1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase E2F1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase E2F1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para E2f1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:E2F1 Anticorpo (KH95): sc-251
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
E2F1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420085-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
E2F1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-420085-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
E2F1 (E2f1) é um fator de transcrição específico de sequência que coordena a transição G1/S ao regular genes necessários para a replicação do DNA, o metabolismo de nucleotídeos e o controlo de checkpoints. Em células de rato, a atividade de E2F1 é controlada pela via de RB e pela sinalização de cinases dependentes de ciclina, integrando estímulos mitogénicos com a progressão do ciclo celular. Para além da proliferação, E2F1 contribui para as respostas a danos no DNA e para a apoptose através de crosstalk com a sinalização associada a p53 e ATM/ATR, influenciando a estabilidade genómica. Programas de E2F1 desregulados estão frequentemente ligados a proliferação aberrante, stress de replicação e transformação oncogénica, tornando o E2f1 um nó amplamente estudado na biologia do cancro e na investigação do ciclo celular.
E2F1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus E2f1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de E2f1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função E2f1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com E2f1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.