E-cadherin Plasmide Double Nickase (canine): sc-437341-NIC
- Specie Target: canine
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- E-cadherin Plasmide Double Nickase (canine) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il E-cadherin Double Nickase Plasmid (canine) e il E-cadherin Double Nickase Plasmid (canine2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira . Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
E-cadherin Plasmide Double Nickase (canine) | sc-437341-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
E-cadherin Plasmide Double Nickase (canine2) | sc-437341-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La E-caderina canina (CDH1) è una molecola di adesione cellula–cellula dipendente dal calcio che si localizza nelle giunzioni aderenti e collega l’integrità dell’epitelio al citoscheletro di actina tramite il legame con le catenine. Sequestrando la β-catenina alla membrana, l’E-caderina contribuisce a regolare la segnalazione Wnt/β-catenina, l’inibizione da contatto e i programmi di polarità epiteliale che modellano l’architettura tissutale. Un’alterata espressione di E-caderina o il rimodellamento delle giunzioni è strettamente associato alla transizione epitelio-mesenchimale (EMT), a cambiamenti dei fenotipi di migrazione e invasione e a una funzione di barriera compromessa in diverse patologie epiteliali. Nella ricerca biomedica canina, la perturbazione di CDH1 viene spesso utilizzata per studiare le reti di segnalazione giunzionale, gli stati di differenziamento e la plasticità cellulare associata ai tumori in modelli di organoidi e linee cellulari.
E-cadherin Il plasmide Double Nickase (canine) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus nelle linee cellulari canine. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di . Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di . Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.