Dynein HC Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400919-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Dynein HCO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Dynein HC (h) e o Plasmídeo Double Nickase Dynein HC (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DYNC1H1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Dynein HC Anticorpo (C-5): sc-514579
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Dynein HC Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400919-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dynein HC Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400919-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DYNC1H1 codifica a cadeia pesada 1 da dineína citoplasmática, um motor ATPase central que impulsiona o transporte direcionado para a extremidade menos ao longo dos microtúbulos. A cadeia pesada da dineína coordena o tráfego intracelular de cargas, o posicionamento de organelos, a montagem do fuso mitótico e o transporte axonal retrógrado por meio de interações com a dinactina e adaptadores de carga, integrando-se com a dinâmica dos microtúbulos e com vias de controlo do ciclo celular. A perturbação do transporte dependente de dineína tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e neuromusculares, refletindo o papel essencial da proteína na polaridade neuronal e no movimento de vesículas a longa distância. Consequentemente, o DYNC1H1 é amplamente estudado na regulação do citoesqueleto, na homeostase neuronal e nos mecanismos de logística intracelular.
Dynein HC O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DYNC1H1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DYNC1H1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DYNC1H1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DYNC1H1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.