Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 Double Nickase Plasmid (m): sc-420082-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 Double-Nickase-Plasmid (m) und Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Dvl3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3: sc-271295
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 Double Nickase Plasmid (m) | sc-420082-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-420082-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das murine Gen **Dvl3** kodiert **Dishevelled 3 (Dvl-3)**, ein zytoplasmatisches Phosphoprotein, das als zentrales Gerüstprotein im **Wnt-Signalweg** fungiert. Dvl-3 überträgt Signale von **Frizzled-Rezeptoren** an nachgeschaltete Effektoren sowohl in der kanonischen, **β‑Catenin‑abhängigen** Transkription als auch in nicht-kanonischen Wegen wie **planarer Zellpolarität (PCP)** und dem **Wnt/Ca²⁺‑Signalweg** und beeinflusst damit Zellpolarität, Migration und die Umgestaltung des Zytoskeletts. Über diese Netzwerke trägt DVL3 zur embryonalen Musterbildung und zur Gewebehomöostase bei; eine fehlregulierte Wnt–Dishevelled-Signalgebung ist häufig an onkogenen Signalwegen, Entwicklungsdefekten und fibroseassoziiertem Remodeling beteiligt. Eine Störung von **Dvl3** wird daher breit eingesetzt, um den Signalweg‑Crosstalk mit **GSK3β/β‑Catenin**, **JNK‑Signalgebung** und **Small‑GTPase‑vermittelter Aktindynamik** zu untersuchen.
Dvl-3/Dishevelled 3/DVL3 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Dvl3-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Dvl3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Dvl3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Dvl3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.