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Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1双切口酶质粒(h) | sc-400785-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1双切口酶质粒(h2) | sc-400785-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DVL1 编码 Dishevelled 1(Dvl-1),是一种位于细胞质中的关键支架蛋白,负责将 Frizzled 受体与下游 Wnt 信号通路耦联起来。通过受调控的相互作用与磷酸化,DVL1 协调经典的 Wnt/β-连环蛋白转录程序,以及非经典的平面细胞极性(PCP)和 Wnt/Ca²⁺ 通路,从而影响细胞骨架动力学、细胞极性与细胞迁移。DVL1 的活性参与发育模式形成、类干细胞行为与组织稳态维持;而在肿瘤生物学中,异常的 Wnt–Dishevelled 信号常与增殖失控和侵袭增强相关。这些特性使 DVL1 成为研究人类细胞中通路串扰、信号复合体(signalosome)组装以及情境特异性 Wnt 输出的有用靶点。
Dvl-1/Dishevelled 1/DVL1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DVL1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DVL1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DVL1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DVL1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。