DPEP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407451

Visão geral

DPEP1 (dipeptidase 1) codifica uma metaloprotease de zinco ancorada à membrana, predominantemente localizada na superfície apical de células epiteliais, onde hidrolisa uma variedade de dipeptídeos e metabólitos conjugados à glutationa. Por meio de sua atividade enzimática, a DPEP1 contribui para a renovação de peptídeos e para o metabolismo de xenobióticos, interagindo com processos de desintoxicação dependentes de glutationa e com funções de transporte epitelial. Alterações na expressão de DPEP1 foram relatadas em múltiplas neoplasias derivadas de epitélio e em contextos inflamatórios, associando essa enzima à remodelação do microambiente pericelular e a mudanças no processamento metabólico. Como uma ectoenzima com motivos catalíticos bem definidos, a DPEP1 constitui um alvo viável para estudar a biologia de proteases de membrana, respostas ao estresse metabólico e estados de diferenciação epitelial.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DPEP1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DPEP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DPEP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DPEP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DPEP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DPEP1 para a investigação da sinalização de DPEP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DPEP1 críticos para a função DPEP1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DPEP1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo DPEP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo DPEP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DPEP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo DPEP1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR DPEP1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DPEP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DPEP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.