Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Dnmt2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420034
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Dnmt2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Dnmt2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Dnmt2 Anticorpo (D-9): sc-365001
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Dnmt2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420034 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Trdmt1 codifica a Dnmt2, uma metiltransferase de citosina-5 de RNA altamente conservada que modifica predominantemente tRNAs (notadamente m5C na citosina 38), influenciando a estabilidade do tRNA, a fidelidade de decodificação e as respostas celulares ao estresse. Por meio da regulação da metilação de RNA, a Dnmt2 contribui para o controle da tradução e para redes epitranscritômicas mais amplas que se cruzam com vias de processamento de RNA e de manutenção do genoma. Alterações na atividade de TRDMT1/DNMT2 têm sido associadas à perturbação da proteostase e da adaptação ao estresse, com relevância relatada para fenótipos oncogênicos e processos neurobiológicos em sistemas modelo. Em camundongos, Trdmt1 é frequentemente estudado por seu papel na regulação da expressão gênica mediada por RNA, na homeostase celular e em respostas dependentes do contexto a estressores ambientais e metabólicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Dnmt2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Trdmt1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Trdmt1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Trdmt1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Dnmt2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Trdmt1 para a investigação da sinalização de Dnmt2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Trdmt1 críticos para a função Dnmt2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Trdmt1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Dnmt2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Dnmt2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Trdmt1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Dnmt2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Dnmt2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Trdmt1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Trdmt1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.