Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Dnmt1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420033-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Dnmt1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Dnmt1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Dnmt1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Dnmt1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Dnmt1 Anticorpo (H-12): sc-271729
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Dnmt1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420033-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dnmt1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-420033-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O Dnmt1 de camundongo codifica a DNA (citosina-5)-metiltransferase 1, a principal metiltransferase de manutenção, que copia os padrões de metilação em CpG para o DNA recém-sintetizado durante a fase S. A DNMT1 atua em coordenação com UHRF1, PCNA e fatores associados à cromatina para preservar a informação epigenética, moldando programas transcricionais, o imprinting genômico e a inativação do cromossomo X. Ao estabilizar a metilação em elementos repetitivos, a DNMT1 contribui para o silenciamento de transposons e para a integridade do genoma, ligando sua atividade à replicação do DNA, à organização da cromatina e às respostas a danos no DNA. A desregulação da metilação dependente de DNMT1 é amplamente associada a estados alterados de expressão gênica no câncer e a fenótipos epigenéticos e do neurodesenvolvimento em sistemas modelo, o que a torna um alvo comum para estudos mecanísticos da manutenção do epigenoma.
Dnmt1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Dnmt1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Dnmt1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Dnmt1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Dnmt1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.