Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DnaJB6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404227
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- DnaJB6 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico DnaJB6, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DnaJB6 Anticuerpo (B-5): sc-365574
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
DnaJB6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404227 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
DNAJB6 codifica DnaJB6, un miembro de la familia de cocaperonas Hsp40/DnaJ que coopera con Hsp70 para regular el plegamiento de proteínas, su clasificación/gestión y la proteostasis en condiciones basales y de estrés. Se ha implicado a DnaJB6 en la supresión de la agregación de proteínas mal plegadas y contribuye a la organización del citoesqueleto, al control de calidad asistido por chaperonas y a la señalización sensible al estrés que influye en la homeostasis celular. La alteración de la función de DNAJB6 se ha vinculado a trastornos caracterizados por agregación proteica y patología muscular, incluida la distrofia muscular de cinturas, y también se estudia en el contexto del estrés proteotóxico relevante para la neurodegeneración. Estas conexiones biológicas hacen de DNAJB6 un nodo útil para desentrañar las vías que gobiernan la agregación, las redes de chaperonas y la resiliencia celular frente a proteínas mal plegadas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO DnaJB6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DNAJB6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DNAJB6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DNAJB6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DnaJB6.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DNAJB6 para la investigación de la señalización de DnaJB6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de DNAJB6 críticos para la función de DnaJB6
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DNAJB6 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido DnaJB6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido DnaJB6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DNAJB6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DnaJB6 (h) y el plásmido HDR DnaJB6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DNAJB6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DNAJB6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.