Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DNA Ligase IV Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401372-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DNA Ligase IVO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DNA Ligase IV (h) e o Plasmídeo Double Nickase DNA Ligase IV (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LIG4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DNA Ligase IV Anticorpo (D-8): sc-271299
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DNA Ligase IV Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401372-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DNA Ligase IV Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401372-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LIG4 codifica a DNA ligase IV, uma ligase dependente de ATP que sela as extremidades de quebras de dupla fita do DNA durante a junção de extremidades não homólogas clássica (c-NHEJ). Atuando em conjunto com XRCC4, XLF/NHEJ1 e o complexo DNA-PK, a DNA ligase IV é essencial para a estabilidade do genoma, a recombinação V(D)J e o reparo de lesões induzidas por radiação ionizante. A disfunção de LIG4 compromete a fidelidade do reparo de quebras de dupla fita, aumentando aberrações cromossômicas e a sensibilidade ao estresse genotóxico. Variantes patogênicas estão associadas à síndrome de LIG4 e a fenótipos mais amplos de imunodeficiência e radiossensibilidade, tornando essa via central para estudos da resposta a danos no DNA e do desenvolvimento de linfócitos.
DNA Ligase IV O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LIG4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LIG4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LIG4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LIG4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.