DNA Ligase I Lentiviral Activation Particles (h): sc-402830-LAC

ヒトLIG1はDNAリガーゼIをコードしており、ATP依存性のリガーゼとして、ラギング鎖DNA複製、岡崎フラグメントの処理、ならびにロングパッチ塩基除去修復の過程で、ホスホジエステル結合形成を触媒することでDNAのニック（切れ目）を封鎖します。DNAリガーゼIは複製フォークで機能し、PCNA、RFC、FEN1、各種ポリメラーゼと協調して制御されるDNA損傷応答ネットワークの中でも働き、ゲノム安定性と正確な細胞周期進行を支えます。LIG1の活性や発現の攪乱は、複製ストレスの増大、鎖切断の蓄積、変異負荷の増加と関連し、発がんやその他のゲノム不安定性表現型に影響し得ます。複製に共役した修復の中核因子として、LIG1はS期チェックポイント、クロマチン維持、酸化損傷やアルキル化損傷に対する応答を制御する経路で一般的に研究されています。

DNA Ligase I レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なLIG1の発現上昇を可能にします。

DNA Ligase I レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、LIG1転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性DNA Ligase Iの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のLIG1ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。