Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
DinB Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405052-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DinBO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DinB (h) e o Plasmídeo Double Nickase DinB (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para POLK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DinB Anticorpo (A-9): sc-166667
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DinB Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405052-NIC | 20 µg | $410.00 |
O POLK humano codifica a polimerase de DNA kappa (DinB), uma polimerase de síntese por translesão da família Y que permite a replicação através de adutos volumosos no DNA e outras lesões que, de outra forma, bloqueariam a polimerase replicativa. O POLK atua na tolerância a danos no DNA e na manutenção da progressão da forquilha de replicação, interagindo com o antígeno nuclear de células em proliferação (PCNA) e participando de vias coordenadas pela sinalização de estresse replicativo mediada por ATR. Sua atividade de bypass de lesões influencia os espectros de mutação e a estabilidade do genoma, associando a desregulação de POLK a respostas celulares alteradas ao estresse genotóxico e à mutagênese aberrante. Assim, o POLK é estudado no contexto do equilíbrio das redes de reparo de DNA, da biologia do estresse replicativo e dos mecanismos que moldam o acúmulo de mutações somáticas.
DinB O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus POLK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de POLK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função POLK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com POLK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.