Dia 2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403238

개요

DIAPH2(Dia 2)는 Rho 계열 GTPase 신호전달의 하위 경로에서 액틴 필라멘트의 핵생성과 신장을 조절하는 diaphanous 관련 formin을 암호화합니다. 세포골격 재구성에서의 역할을 통해 DIAPH2는 세포 형태 조절, 부착(접착) 역학, 방향성 이동에 기여하며, 이러한 과정들은 세포질분열과 세포 극성 유지와 밀접하게 연관되어 있습니다. formin 의존적 액틴 조직화가 변형되면 방추체 위치 결정과 유전체 안정성이 교란될 수 있어, DIAPH2 관련 경로가 증식 및 발달 관련 표현형과 연결될 수 있습니다. DIAPH2는 또한 세포골격 조절 이상이 관련되는 생식생물학 및 종양성 세포 행동의 맥락에서도 연구되어 왔습니다.

Dia 2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DIAPH2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DIAPH2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DIAPH2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Dia 2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Dia 2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DIAPH2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Dia 2 기능에 중요한 DIAPH2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DIAPH2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Dia 2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Dia 2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DIAPH2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Dia 2 HDR 플라스미드 (h) 및 Dia 2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DIAPH2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DIAPH2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.