Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DHFR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416991-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DHFRL1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DHFRL1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DHFRL1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DHFR2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DHFR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416991-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DHFRL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416991-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O DHFR2 humano codifica a diidrofolato redutase (DHFR), uma enzima dependente de NADPH que catalisa a redução do diidrofolato a tetraidrofolato, sustentando o metabolismo de um carbono necessário para a biossíntese de novo de timidilato e purinas. Por meio do seu papel no ciclo do folato, a DHFR dá suporte à replicação e ao reparo do DNA, à progressão do ciclo celular e à capacidade de metilação celular, por sua ligação ao metabolismo de metionina/S-adenosilmetionina. A perturbação da atividade da DHFR influencia o equilíbrio dos pools de nucleotídeos e a estabilidade do genoma, processos frequentemente examinados em contextos de estresse proliferativo e remodelação metabólica. Assim, a biologia da DHFR é amplamente utilizada para estudar vias biossintéticas dependentes de folato e respostas celulares à depleção de nucleotídeos e ao estresse replicativo.
DHFRL1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DHFR2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DHFR2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DHFR2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DHFR2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.