Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DHFR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417022-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DHFRO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DHFR (h) e o Plasmídeo Double Nickase DHFR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DHFR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DHFR Anticorpo (F-8): sc-74594
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DHFR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417022-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DHFR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-417022-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A DHFR (di-hidrofolato redutase) humana catalisa a redução do di-hidrofolato a tetrahidrofolato dependente de NADPH, sustentando o metabolismo de um carbono necessário para a biossíntese de novo de purinas e timidilato. Por meio do seu papel central na produção de nucleotídeos, a DHFR dá suporte à replicação e ao reparo do DNA, à progressão da fase S e à proliferação, conectando o metabolismo do folato à manutenção do genoma. A atividade da DHFR está intimamente ligada às respostas ao estresse metabólico e à sensibilidade celular à pressão de antifolatos, o que a torna um marcador amplamente utilizado em estudos de adaptação metabólica e seleção. Alterações desreguladas no fluxo da via do folato e mudanças na expressão ou no número de cópias de DHFR têm sido associadas a fenótipos proliferativos e à variabilidade de resposta a fármacos em múltiplos contextos de doença.
DHFR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DHFR em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DHFR. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DHFR. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DHFR interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.