DHCR7 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419997-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DHCR7O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DHCR7 (m) e o Plasmídeo Double Nickase DHCR7 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Dhcr7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DHCR7 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419997-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DHCR7 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419997-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Dhcr7 codifica a redutase do 7-desidrocolesterol (DHCR7), uma enzima de membrana do retículo endoplasmático que catalisa a redução terminal do 7-desidrocolesterol a colesterol no ramo de Kandutsch–Russell da via de biossíntese do colesterol. Ao controlar a disponibilidade de colesterol, a DHCR7 influencia a composição de microdomínios de membrana, a esteroidogênese e processos de sinalização dependentes de lipídios que moldam a proliferação e a diferenciação celulares. A interrupção da atividade da DHCR7 perturba a homeostase de esteróis, com acúmulo de esteróis precursores, alterando a sensibilidade ao estresse oxidativo e redes de sinalização do desenvolvimento. Em sistemas murinos, Dhcr7 é amplamente utilizado para modelar como o desequilíbrio na via do colesterol impacta fenótipos de neurodesenvolvimento, metabólicos e de tráfego de membranas relevantes para a biologia de doenças genéticas relacionadas a esteróis.
DHCR7 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Dhcr7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Dhcr7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Dhcr7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Dhcr7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.