Derlin-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-426756-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Derlin-1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Derlin-1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Derlin-1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Derl1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:? Anticorpo (?):
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Derlin-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-426756-NIC | 20 µg | $410.00 |
Derl1 codifica a Derlin-1, um componente de membrana do retículo endoplasmático (RE) da maquinaria de degradação associada ao RE (ERAD), que ajuda a reconhecer e a retrotranslocar proteínas luminais e de membrana mal dobradas para sua eliminação pelo sistema ubiquitina–proteassoma. A Derlin-1 atua em redes de proteostase ligadas à resposta a proteínas mal dobradas (UPR), coordenando-se com fatores de ubiquitinação e complexos de extração acionados por ATPases para manter a homeostase do RE. A disrupção do controle de qualidade dependente de DERL1 pode aumentar a sinalização de estresse do RE e alterar a função da via secretória, conectando essa via a decisões de sobrevivência celular sob estresse proteotóxico. Em sistemas murinos, Derl1 é frequentemente estudado em contextos em que a remodelação de ERAD e UPR influencia a função imune, a homeostase metabólica e fenótipos de proteostase relevantes para a neurobiologia.
Derlin-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Derl1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Derl1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Derl1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Derl1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.