DDX34 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-411318-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDX34O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DDX34 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DDX34 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DHX34. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DDX34 Anticorpo (E-3): sc-514665
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDX34 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-411318-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDX34 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-411318-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DHX34 (DDX34) codifica uma helicase de RNA conservada do tipo DEAH-box que participa do metabolismo pós-transcricional do RNA e da regulação da vigilância de mRNA. Está associada à degradação de mRNA mediada por códon de terminação prematuro (nonsense-mediated mRNA decay, NMD) e a eventos de processamento de RNA que influenciam a estabilidade dos transcritos e o controle de qualidade, moldando assim programas de expressão gênica durante o crescimento e a diferenciação celular. A perturbação da atividade de DHX34 pode alterar a homeostase de RNA e a sinalização de resposta ao estresse, tornando-a relevante para o estudo de vias que conectam a vigilância de RNA à integridade do genoma e à aptidão celular. Alterações na expressão ou na função de DHX34 foram relatadas em estudos moleculares de estados transcricionais associados a malignidades, sustentando seu uso como um nó mecanístico em redes regulatórias de RNA relevantes para doenças.
DDX34 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DHX34 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DHX34. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DHX34. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DHX34 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.