DDX1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405137-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDX1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DDX1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DDX1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DDX1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DDX1 Anticorpo (A-7): sc-271438
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDX1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405137-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDX1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405137-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DDX1 (helicase DEAD-box 1) é uma helicase de RNA humana dependente de ATP que remodela o RNA e complexos ribonucleoproteicos para apoiar o processamento, o transporte e a tradução de RNA. Participa do metabolismo de RNA associado à transcrição e contribui para a manutenção da integridade do genoma por meio de interações com a maquinaria de resposta a danos no DNA e de reparo. DDX1 também tem sido implicada na sinalização imune inata, por meio da regulação de vias de detecção de RNA e de grânulos ribonucleoproteicos responsivos ao estresse. A atividade ou a expressão desregulada de DDX1 tem sido associada a proliferação alterada e à homeostase de RNA em contextos relevantes para o câncer, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos da função de helicases de RNA.
DDX1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DDX1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DDX1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DDX1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DDX1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.