DDI2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408297-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDI2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DDI2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DDI2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DDI2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DDI2 Anticorpo (A-3): sc-514004
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDI2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408297-NIC | 20 µg | $410.00 |
DDI2 (homólogo 2 do gene induzível por dano ao DNA 1) codifica um fator semelhante a uma protease aspártica que sustenta a proteostase e a transcrição adaptativa ao estresse, sobretudo por permitir a recuperação do proteassoma por meio do processamento do fator de transcrição ancorado ao RE NFE2L1/NRF1 após a inibição do proteassoma. Por essa via dependente de NRF1, DDI2 ajuda a coordenar a expressão de subunidades do proteassoma e de outros genes de controle de qualidade, conectando a degradação dependente de ubiquitina às respostas celulares ao estresse proteotóxico. A função de DDI2 se cruza com a degradação associada ao RE e com a sinalização mais ampla da resposta a proteínas mal dobradas, influenciando como as células se adaptam à capacidade comprometida de degradação de proteínas. A desregulação desse eixo é relevante para a tolerância ao estresse em células cancerosas e para defeitos de proteostase relacionados à neurodegeneração, tornando DDI2 um alvo útil para estudos mecanísticos da homeostase do proteassoma.
DDI2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DDI2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DDI2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DDI2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DDI2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.