DcR2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403389-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DcR2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DcR2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DcR2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TNFRSF10D. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DcR2 Anticorpo (B-P30): sc-65310
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DcR2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403389-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DcR2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403389-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TNFRSF10D codifica o receptor isca 2 (DcR2), um membro da superfamília de receptores de TNF que se liga ao TRAIL (TNFSF10), mas não possui um domínio de morte citoplasmático funcional, modulando assim a sinalização de apoptose extrínseca na superfície celular. Ao competir com receptores de morte como DR4 e DR5 pela ligação ao ligante, o DcR2 pode remodelar a ativação de caspases a jusante, as saídas de sinalização de NF-κB e programas de resposta ao estresse que influenciam decisões sobre o destino celular. O DcR2 também está associado a fenótipos ligados à senescência e a contextos de sinalização inflamatória nos quais o equilíbrio da via de TRAIL afeta a homeostase tecidual. Alterações na expressão de TNFRSF10D foram relatadas em múltiplos cenários relevantes para doenças, sustentando seu uso como um nó mecanístico para estudar resistência à apoptose e redes de sinalização relacionadas ao sistema imune.
DcR2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TNFRSF10D em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TNFRSF10D. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TNFRSF10D. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TNFRSF10D interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.