Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Cytokeratin 18 Antibody (C-04) HRP: sc-51582 HRP. Direct western blot analysis of Cytokeratin 18 expression in MTE1D (A), T24 (B), Hep G2 (C), c4 (D), PC-3 (E) and SK-BR-3 (F) whole cell lysates.
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Cytokeratin 18双切口酶质粒(h): sc-400305-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Cytokeratin 18 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Cytokeratin 18双切酶质粒（h）和Cytokeratin 18双切酶质粒（h2）编码针对KRT18的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Cytokeratin 18: sc-32329，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Cytokeratin 18双切口酶质粒(h) | sc-400305-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cytokeratin 18双切口酶质粒(h2) | sc-400305-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KRT18 编码细胞角蛋白 18（cytokeratin 18），这是一种 I 型中间丝蛋白，可与角蛋白 8 异源聚合，形成单层上皮细胞核心的细胞骨架网络。细胞角蛋白 18 维持细胞的机械稳定性、细胞器定位以及上皮极性，并且在有丝分裂和应激反应过程中，会通过磷酸化依赖的丝状结构重排而发生动态重塑。它还参与与细胞凋亡相关的细胞骨架变化，包括由半胱天冬酶（caspase）介导的切割，这种切割可影响上皮细胞的完整性与信号传导。KRT18 的表达水平变化、丝状结构组织异常或切割模式改变与上皮损伤及多种病理状态相关，因此在研究上皮稳态与应激机制中，它常被用作标志物和关键机制节点。
Cytokeratin 18 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 KRT18 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对KRT18内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏KRT18的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了KRT18基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。