Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO cytoglobin (h): sc-402949
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- cytoglobin Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique cytoglobin, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: cytoglobin Antibody (D-7): sc-365246
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO cytoglobin (h) | sc-402949 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CYGB code la cytoglobine, une globine hexacoordinée exprimée dans de nombreux tissus, qui se lie à l’oxygène et à l’oxyde nitrique et contribue à l’équilibre rédox cellulaire. La cytoglobine est impliquée dans la protection contre le stress oxydatif et nitrosatif, en modulant la signalisation dépendante de l’hypoxie, la gestion des espèces réactives de l’oxygène et le métabolisme de l’oxyde nitrique. Par ces mécanismes, CYGB a été associé à la régulation de l’activation des fibroblastes, de la fonction vasculaire et de l’adaptation cellulaire aux microenvironnements pauvres en oxygène. Une expression altérée de CYGB a été rapportée dans des contextes pertinents pour la biologie tumorale, le stress inflammatoire et la fibrose d’organes, ce qui appuie son utilisation comme cible mécanistique dans des études de voies et de phénotypes.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO cytoglobin (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CYGB dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CYGB, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CYGB à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine cytoglobin.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CYGB pour l'étude de la signalisation de cytoglobin, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CYGB essentiels à la fonction de cytoglobin
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CYGB pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le cytoglobin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le cytoglobin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CYGB. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le cytoglobin plasmide HDR (h) et le cytoglobin (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CYGB pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CYGB définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.