cyclin C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402308

Visão geral

CCNC codifica a ciclina C, uma ciclina conservada que atua principalmente em parceria com a CDK8 e quinases relacionadas no âmbito do complexo Mediator, para modular a transcrição dependente da RNA polimerase II. Por meio da sinalização da quinase do Mediator, a ciclina C ajuda a integrar estímulos das vias MAPK, Wnt/β-catenina e de outras vias responsivas ao estresse, coordenando o controle do ciclo celular, programas de diferenciação e respostas transcricionais adaptativas. A ciclina C também tem sido associada à dinâmica mitocondrial e à sinalização de estresse oxidativo, refletindo seu papel na interface entre a transcrição nuclear e a homeostase celular. A desregulação do controle transcricional mediado por CCNC tem sido associada a alterações de proliferação e de programas de expressão gênica observadas em diferentes tipos de câncer e em outros distúrbios que envolvem sinalização aberrante e respostas ao estresse.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO cyclin C (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CCNC em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CCNC, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CCNC na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína cyclin C.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CCNC para a investigação da sinalização de cyclin C, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CCNC críticos para a função cyclin C
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CCNC para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo cyclin C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo cyclin C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CCNC. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo cyclin C Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR cyclin C (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CCNC para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CCNC definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.