CUG-BP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403267

Visão geral

CELF2 (CUG-BP2) é uma proteína de ligação a RNA da família CELF que coordena a regulação gênica pós-transcricional ao controlar o splicing alternativo, a estabilidade do mRNA e a tradução em diversos transcritos. Ela participa do acoplamento do processamento de RNA a sinais de sinalização durante a diferenciação celular e respostas ao estresse, influenciando redes envolvidas na organização do citoesqueleto, no controle do ciclo celular e na apoptose. Programas de RNA dependentes de CELF2 contribuem para a seleção de isoformas de transcritos específicas de tecido e são frequentemente estudados no contexto da ativação de células imunes e da regulação gênica do desenvolvimento. A atividade desregulada de CELF2 tem sido associada a alterações nos perfis de splicing observadas em modelos neuromusculares e relacionados ao câncer, motivando estudos mecanísticos de seus alvos de RNA e parceiros regulatórios.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CUG-BP2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CELF2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CELF2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CELF2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CUG-BP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CELF2 para a investigação da sinalização de CUG-BP2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CELF2 críticos para a função CUG-BP2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CELF2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo CUG-BP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CUG-BP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CELF2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo CUG-BP2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CUG-BP2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CELF2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CELF2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.