CTDSPL2 Lentiviral Activation Particles (m2): sc-435953-LAC-2

マウスのCtdspl2はCTDSPL2（核内に局在するハロ酸デハロゲナーゼ〔HAD〕ファミリーのホスファターゼ）をコードしており、RNAポリメラーゼIIのC末端ドメイン（CTD）内セリン残基の脱リン酸化を介して転写制御に関与し、細胞周期制御や分化に結び付く遺伝子発現プログラムに影響を与える。CTDSPL2は、クロマチン関連過程、RNAプロセシング、ならびに哺乳類細胞における発生経路の出力を協調させるホスファターゼ媒介性シグナル伝達ネットワークの一部として位置付けられる。CTD指向性ホスファターゼ活性の破綻は、増殖ストレスや系譜決定の変化を扱うモデルに広く関連するため、Ctdspl2はリン酸化依存的な転写制御機構の研究に有用な標的となる。マウス系でのCtdspl2遺伝子編集は、核内ホスファターゼ活性の機能解析、RNA-seqやChIP系アッセイによる下流の転写学的影響のマッピング、さらには改変細胞株やin vivo遺伝学モデルにおける経路間相互作用の解明を可能にする。

CTDSPL2 レンチウイルス活性化粒子（m2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なCtdspl2の発現上昇を可能にします。

CTDSPL2 レンチウイルス活性化粒子（m2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、Ctdspl2転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性CTDSPL2の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のCtdspl2ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。