CSN8 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-409800-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CSN8O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CSN8 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CSN8 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para COPS8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CSN8 Anticorpo (F-8): sc-393482
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CSN8 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-409800-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CSN8 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-409800-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COPS8 codifica a CSN8, um componente central do sinalossoma COP9 (CSN) que regula ligases E3 de ubiquitina do tipo cullin-RING por meio do controle da dinâmica de neddilação/desneddilação das cullinas. Ao modular a proteostase dependente de ubiquitina, a CSN8 influencia a progressão do ciclo celular, as respostas a danos no DNA e vias de transdução de sinal que dependem da renovação oportuna de proteínas reguladoras-chave. A função da CSN8 se cruza com a atividade do sistema ubiquitina–proteassoma e com programas adaptativos ao estresse, como a autofagia, moldando a homeostase celular em estados proliferativos e diferenciados. A desregulação de subunidades do sinalossoma COP9, incluindo expressão alterada de COPS8 ou perturbação da integridade do CSN, tem sido associada a controle anormal de crescimento e a alterações relevantes para doenças na estabilidade do proteoma em células humanas.
CSN8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus COPS8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de COPS8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função COPS8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com COPS8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.