CRP2 Plasmide Double Nickase (h): sc-409601-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CRP2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CRP2 Double Nickase Plasmid (h) e il CRP2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CSRP2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CRP2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-409601-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CRP2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-409601-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSRP2 codifica la proteina 2 ricca di cisteina e glicina (CRP2), un regolatore del legame con l’actina contenente domini LIM, arricchito nel muscolo liscio e in diversi tipi cellulari vascolari. CRP2 si localizza nel citoscheletro e nel nucleo, dove coordina la dinamica dell’actina con programmi trascrizionali che modellano adesione, migrazione e differenziamento cellulari. Partecipa al rimodellamento del citoscheletro e alle vie di meccanotrasduzione, influenzando l’espressione genica tramite interazioni con partner a dominio LIM e co-regolatori trascrizionali. Un’alterazione dell’espressione di CSRP2/CRP2 è stata riportata in contesti che coinvolgono rimodellamento vascolare, comportamento dei miofibroblasti associato alla fibrosi e motilità delle cellule tumorali, a supporto del suo studio nelle transizioni di stato cellulare rilevanti per la malattia.
CRP2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CSRP2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CSRP2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CSRP2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CSRP2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.