CRP1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406188

Panoramica

CSRP1 codifica la proteina 1 ricca di cisteina e glicina (CRP1), un fattore di legame all’actina contenente un dominio LIM che modula l’organizzazione del citoscheletro e programmi trascrizionali legati alla forma e alla motilità cellulare. CRP1 partecipa alla dinamica delle fibre di stress dell’actina e alla segnalazione associata alle adesioni focali, contribuendo a coordinare la differenziazione del muscolo liscio e, più in generale, il comportamento delle cellule mesenchimali. Influenzando vie dipendenti dall’adesione e reti di regolazione genica, CSRP1 è spesso studiato in contesti di rimodellamento tissutale e invasione cellulare. Un’espressione alterata di CSRP1 è stata riportata in molteplici quadri patologici, inclusi tumori e patologie fibrotiche, in cui le variazioni nel controllo del citoscheletro e nello stato di differenziazione rappresentano temi sperimentali centrali.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CRP1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CSRP1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CSRP1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CSRP1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CRP1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CSRP1 per lo studio della segnalazione di CRP1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni CSRP1 critici per la funzione di CRP1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CSRP1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CRP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal CRP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CSRP1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CRP1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR CRP1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CSRP1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CSRP1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.