Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CRP Plasmide Double Nickase (h): sc-401767-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CRP Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CRP Double Nickase Plasmid (h) e il CRP Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CRP. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CRP Antibody (26D7): sc-69770
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CRP Plasmide Double Nickase (h) | sc-401767-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CRP Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401767-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La proteina C-reattiva (CRP) è una molecola di riconoscimento di pattern della famiglia delle pentraxine, prodotta prevalentemente dagli epatociti in risposta a citochine pro-infiammatorie, in particolare l’IL-6, e circola come uno dei principali reattanti della fase acuta. La CRP si lega alla fosforilcolina e ad altri ligandi presenti su cellule danneggiate e sulle superfici microbiche, promuovendo l’opsonizzazione e l’attivazione della via classica del complemento tramite C1q. Attraverso questi processi dell’immunità innata, la CRP integra la segnalazione infiammatoria con la rimozione mediata dal complemento e modula le interazioni con i recettori Fcγ sulle cellule mieloidi. La variazione genetica e l’espressione deregolata della CRP sono ampiamente studiate nel contesto dell’infiammazione sistemica e di fenotipi cardiometabolici e associati ad autoimmunità, rendendola un importante indicatore molecolare e regolatore nella biologia dell’infiammazione.
CRP Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CRP nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CRP. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CRP. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CRP interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.