CRISP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406818

概要

CRISP1は、嚢胞（システイン）に富む分泌タンパク質1（CRISP-1）をコードします。CRISP-1はCAP（cysteine-rich secretory proteins、antigen 5、pathogenesis-related 1）スーパーファミリーに属する分泌タンパク質であり、生殖路の生理機能に関与します。CRISP-1は精子成熟や精子表面での機能的相互作用と関連し、受精能獲得（capacitation）、運動性の制御、配偶子間相互作用に関わる過程に影響を与えます。保存されたシステインリッチドメインを介して、CRISP-1は細胞外でのタンパク質間相互作用に関与し、CRISPファミリーの関連タンパク質で報告されているイオンチャネル活性の調節にも関与し得ることから、精子機能を形作るシグナル伝達イベントとの関連が示唆されます。CRISP1の発現変化は、男性生殖表現型や不妊に関連する分子プロファイルの文脈で研究されており、生殖生物学研究におけるマーカーおよび機構解析上の重要な結節点としての有用性が支持されています。

CRISP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCRISP1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CRISP1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CRISP1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CRISP-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CRISP-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CRISP1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CRISP-1の機能に不可欠なCRISP1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CRISP1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CRISP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCRISP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CRISP1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CRISP-1 HDRプラスミド（h）および CRISP-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCRISP1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCRISP1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。