CR1L Double Nickaseプラスミド (h): sc-405453-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- CR1L Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- CR1Lダブルニカースプラスミド（h）およびCR1Lダブルニカースプラスミド（h2）は、CR1Lを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
CR1L Double Nickaseプラスミド (h) | sc-405453-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CR1L Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-405453-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
補体受容体1様（CR1L）はヒトの遺伝子で、補体活性化の制御因子（RCA）ファミリーに属する補体受容体関連メンバーとして注釈されており、オプソニン化や免疫複合体の処理に関与するCR1と構造的特徴を共有します。CR1との類推から、CR1Lは補体系カスケードの制御、自然免疫による監視、ならびに補体シグナルと貪食や炎症調節といった細胞応答とのクロストークに関連するプロセスに関与すると考えられます。補体制御ネットワークの変動は免疫調節異常や炎症性の組織障害と広く関連しているため、CR1Lは補体関連表現型の機序研究に有用な遺伝子座です。CR1Lを実験的に解析することは、補体駆動性経路、受容体様ドメインの機能、そして免疫関連の細胞モデルにおける遺伝子型—表現型関係の研究を後押しします。
CR1L ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CR1L 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CR1L内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CR1Lの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CR1Lが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。