CPTI-M Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419787
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CPTI-M O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CPTI-M, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CPTI-M Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419787 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cpt1b codifica a isoforma muscular da carnitina palmitoiltransferase 1 (CPTI-M), uma enzima da membrana externa mitocondrial que controla a entrada de ácidos graxos de cadeia longa nas mitocôndrias por meio da geração de acilcarnitinas. Como etapa limitante da taxa da β-oxidação mitocondrial, a CPTI-M conecta a utilização de lipídios à homeostase energética celular e interage funcionalmente com a regulação por malonil-CoA, a sinalização de AMPK e programas metabólicos mais amplos mediados por PPAR. Em tecidos de camundongo com alta demanda oxidativa, a atividade de Cpt1b molda a seleção de combustíveis, a função mitocondrial e a partição de lipídios. Alterações no fluxo dependente de CPTI-M são frequentemente estudadas no contexto de disfunção metabólica, sensibilidade à insulina e miopatias associadas a lipídios, bem como fenótipos cardiometabólicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CPTI-M (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cpt1b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cpt1b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cpt1b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CPTI-M.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cpt1b para a investigação da sinalização de CPTI-M, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cpt1b críticos para a função CPTI-M
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cpt1b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CPTI-M Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CPTI-M Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cpt1b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CPTI-M Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CPTI-M (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cpt1b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cpt1b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.