CPTI Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401811-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CPTIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CPTI (h) e o Plasmídeo Double Nickase CPTI (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CPT1A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CPTI Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401811-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CPTI Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401811-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CPT1A codifica a carnitina palmitoiltransferase 1A (CPTI), a enzima limitante da velocidade que transfere grupos acilo de cadeia longa para a carnitina, permitindo a importação mitocondrial e a β-oxidação. Ao controlar o fluxo de ácidos graxos para dentro das mitocôndrias, a CPTI coordena o catabolismo de lipídios com o balanço energético celular e se conecta à sinalização de AMPK, a programas transcricionais regulados por PPAR e à cetogênese durante estresse nutricional. Alterações na atividade de CPT1A têm sido associadas a erros inatos da oxidação de ácidos graxos e a fenótipos metabólicos envolvendo o manejo hepático de lipídios e a homeostase da glicose. Em biologia do câncer e de células imunes, a oxidação de ácidos graxos dependente de CPT1A é frequentemente estudada como determinante do controle redox, da sobrevivência sob estresse metabólico e de estados bioenergéticos específicos de linhagem.
CPTI O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CPT1A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CPT1A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CPT1A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CPT1A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.