COX5b Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405159-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- COX5bO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase COX5b (h) e o Plasmídeo Double Nickase COX5b (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para COX5B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:COX5b Anticorpo (C-5): sc-374416
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
COX5b Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405159-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
COX5b Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405159-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COX5B codifica a subunidade 5B da citocromo c oxidase (COX5b), um componente do complexo IV mitocondrial codificado no núcleo que ajuda a regular a transferência de elétrons do citocromo c para o oxigênio e sustenta uma fosforilação oxidativa eficiente. Ao contribuir para o bombeamento de prótons e para o potencial de membrana mitocondrial, a COX5b influencia a produção de ATP, o equilíbrio de espécies reativas de oxigênio e a adaptação metabólica sob condições variáveis de oxigênio e nutrientes. A função de COX5B se cruza com vias de biogênese e controle de qualidade mitocondriais, incluindo a montagem da cadeia respiratória e a mitofagia, que são centrais nas respostas celulares ao estresse. Alterações na atividade do complexo IV e disfunção mitocondrial associada a COX5B têm sido vinculadas a defeitos bioenergéticos observados em múltiplos contextos de doença, incluindo fenótipos neuromusculares e neurodegenerativos, nos quais o desempenho mitocondrial limita a sobrevivência e a diferenciação celular.
COX5b O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus COX5B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de COX5B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função COX5B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com COX5B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.