COX4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400616-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- COX4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase COX4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase COX4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para COX4I1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:COX4 Anticorpo (F-8): sc-376731
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
COX4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400616-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
COX4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400616-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COX4I1 codifica a subunidade IV da citocromo c oxidase, isoforma 1 (COX4), um componente regulatório do complexo IV mitocondrial, codificado no núcleo, que ajusta a transferência de elétrons do citocromo c para o oxigênio e dá suporte ao bombeamento de prótons na fosforilação oxidativa. A COX4 integra a respiração mitocondrial à homeostase energética celular e ao equilíbrio redox, influenciando a produção de ATP, a sinalização por espécies reativas de oxigênio (ROS) e a adaptação metabólica à disponibilidade de nutrientes e de oxigênio. A perturbação da função do complexo IV está associada a fenótipos de disfunção mitocondrial, incluindo bioenergética prejudicada e respostas ao estresse alteradas, e é frequentemente investigada em contextos como neurodegeneração, patologia cardiometabólica e metabolismo tumoral. Assim, COX4I1 é um alvo útil para dissecar o controle da respiração mitocondrial e seu acoplamento a programas de sobrevivência, proliferação e diferenciação celular.
COX4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus COX4I1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de COX4I1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função COX4I1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com COX4I1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.