COPA Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404020-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- COPAO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase COPA (h) e o Plasmídeo Double Nickase COPA (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para COPA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:COPA Anticorpo (H-3): sc-398099
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
COPA Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404020-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
COPA Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404020-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COPA codifica a subunidade alfa do complexo coatômero COPI, um regulador central do tráfego vesicular retrógrado do aparelho de Golgi para o retículo endoplasmático e também dentro do próprio Golgi. Ao coordenar a seleção de carga e a montagem do revestimento, COPA sustenta o controle de qualidade de proteínas, a homeostase de lipídios e de membranas e as respostas ao estresse do RE que influenciam a função da via secretora. A perturbação do tráfego dependente de COPA pode alterar a proteostase e a sinalização intracelular, afetando processos como autofagia, atividade do inflamassoma e apresentação de antígenos. Variantes em COPA têm sido associadas a desregulação imune e fenótipos inflamatórios, tornando-a um alvo relevante para estudos mecanísticos de transporte vesicular e de sinalização associada ao estresse.
COPA O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus COPA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de COPA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função COPA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com COPA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.