COL8A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419753
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- COL8A1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico COL8A1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
COL8A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419753 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Col8a1 codifica o colágeno tipo VIII alfa 1 (COL8A1), um colágeno não fibrilar da matriz extracelular, enriquecido em matrizes associadas à membrana basal e em tecidos conjuntivos associados aos vasos. O COL8A1 contribui para a montagem da matriz, a adesão célula–matriz e a regulação de comportamentos celulares como migração e proliferação, por meio de interações com integrinas e redes de remodelamento envolvendo a atividade de MMPs. Em sistemas murinos, alterações na expressão de Col8a1 e na deposição de colágeno VIII são frequentemente estudadas em contextos de remodelamento vascular, acúmulo de matriz fibrótica e reorganização da matriz extracelular associada a feridas. Esses processos se cruzam com programas responsivos ao TGF-β e com vias mais amplas da matriz extracelular que moldam a arquitetura tecidual e microambientes inflamatórios.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO COL8A1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Col8a1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Col8a1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Col8a1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína COL8A1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Col8a1 para a investigação da sinalização de COL8A1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Col8a1 críticos para a função COL8A1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Col8a1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo COL8A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo COL8A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Col8a1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo COL8A1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR COL8A1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Col8a1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Col8a1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.