Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Clock Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419693-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ClockO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Clock (m) e o Plasmídeo Double Nickase Clock (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Clock. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Clock Anticorpo (C-8): sc-271603
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Clock Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419693-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Clock Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419693-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Clock, em camundongos, codifica um fator de transcrição básico hélice–alça–hélice (bHLH) do tipo PAS, que forma um heterodímero com ARNTL/BMAL1 para impulsionar a expressão dos genes centrais do relógio circadiano por meio de elementos E-box. A atividade CLOCK–BMAL1 coordena a regulação por retroalimentação via as proteínas PER e CRY e acopla a transcrição rítmica à remodelação da cromatina, ao controle metabólico e ao timing do ciclo celular. Por meio de crosstalk com vias como a sinalização de cAMP/CREB, a sinalização de glicocorticoides e redes de receptores nucleares, Clock influencia a homeostase energética e as respostas ao estresse. Em contextos de pesquisa, a desregulação da função circadiana envolvendo CLOCK tem sido associada a fenótipos de sono–vigília, características relacionadas à síndrome metabólica, inflamação e programas transcricionais ligados ao câncer.
Clock O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Clock em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Clock. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Clock. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Clock interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.