CLN2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405204-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CLN2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CLN2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CLN2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TPP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CLN2 Anticorpo (G-3): sc-393961
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CLN2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405204-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CLN2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405204-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TPP1 codifica a protease serina lisossomal tripeptidil peptidase 1 (CLN2), que remove tripeptídeos N-terminais de polipeptídeos para dar suporte à renovação de proteínas no lisossomo e à proteostase celular. A função da CLN2 integra-se ao tráfego endo-lisossomal, às vias de autofagia–lisossomo e ao processamento catabólico de substratos destinados à degradação. A perda ou disfunção de TPP1 perturba a homeostase lisossomal, promove o acúmulo de material não degradado e compromete a resiliência neuronal e glial em modelos de biologia do armazenamento lisossomal. Assim, TPP1/CLN2 é amplamente utilizada como um ponto de partida mecanístico para estudar vias de depuração dependentes do lisossomo e respostas de estresse celular relevantes para doenças.
CLN2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TPP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TPP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TPP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TPP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.