CLN2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405204

개요

TPP1은 트리펩타이딜 펩티다아제 1(트리펩타이딜 펩티다아제 1, CLN2)을 암호화하며, 이는 리소좀의 세린 프로테아제로서 리소좀 내 단백질 분해(turnover) 과정에서 폴리펩타이드의 N-말단으로부터 트리펩타이드를 제거합니다. CLN2 활성은 대사적으로 활발한 세포 유형에서 자가포식–리소좀 플럭스, 엔도리소좀 수송(endolysosomal trafficking), 단백질 항상성(proteostasis) 유지와 교차하는 리소좀 의존적 이화(catabolic) 과정을 뒷받침합니다. TPP1 기능의 상실은 리소좀 단백질분해를 교란하고 신경세포의 취약성에 기여하며, 병적 변이는 CLN2 관련 신경성 세로이드 리포푸스키노시스(Neuronal ceroid lipofuscinosis) 및 더 광범위한 리소좀 저장 질환 병리와 연관됩니다. 따라서 TPP1/CLN2는 리소좀 기능, 스트레스 반응, 그리고 분해 장애가 세포 기능 이상으로 이어지는 기전을 다루는 모델에서 널리 연구됩니다.

CLN2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TPP1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TPP1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TPP1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CLN2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CLN2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TPP1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CLN2 기능에 중요한 TPP1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TPP1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CLN2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CLN2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TPP1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CLN2 HDR 플라스미드 (h) 및 CLN2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TPP1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TPP1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.